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作者：袁玉華 單位：天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院空港醫(yī)院檢驗(yàn)科 2020年3月3日，國(guó)家衛(wèi)健委發(fā)布了《新型冠狀病毒肺炎診療方案（試行第七版）》，把新冠病毒抗體檢測(cè)列入新冠肺炎診斷標(biāo)準(zhǔn)：“血清新型冠狀病毒特異性IgM抗體和IgG陽(yáng)性”；“血清新型冠狀病毒特異性IgG抗體由陰性轉(zhuǎn)為陽(yáng)性或恢復(fù)期較急性期4倍及以上升高”。 2020年8月18日發(fā)布的《新型冠狀病毒肺炎診療方案（試行第八版）》進(jìn)行了修改補(bǔ)充： 1. 實(shí)驗(yàn)室檢查 增加“新型冠狀病毒特異性IgM抗體、IgG抗體在發(fā)病1周內(nèi)陽(yáng)性率較低”和可能導(dǎo)致假陽(yáng)性的情形，以及何種情況下可通過(guò)抗體檢測(cè)進(jìn)行診斷等內(nèi)容。 2. 診斷標(biāo)準(zhǔn) 將新型冠狀病毒特異性IgM抗體陽(yáng)性作為疑似病例診斷依據(jù)之一。 4月6日，國(guó)家衛(wèi)健委疾病預(yù)防控制局發(fā)布了《集中醫(yī)學(xué)觀察人員實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方案》，明確任意一次核酸檢測(cè)陽(yáng)性或血清特異性IgM抗體陽(yáng)性者，按照無(wú)癥狀感染者管理。 4月5日，國(guó)務(wù)院聯(lián)防聯(lián)控機(jī)制舉行新聞發(fā)布會(huì)，國(guó)家藥監(jiān)局器械監(jiān)管司副司長(zhǎng)張琪對(duì)新冠抗體檢測(cè)試劑的預(yù)期用途進(jìn)行了說(shuō)明：抗體檢測(cè)試劑僅用作對(duì)新冠病毒核酸檢測(cè)陰性疑似病例的補(bǔ)充檢測(cè)，或在疑似病例診斷中與核酸檢測(cè)協(xié)同使用，不作為新冠病毒感染者確診和排除的依據(jù)，也不適用于一般人群的篩查。 自2020年2月國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)抗體檢測(cè)試劑上市（截止目前，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局共批準(zhǔn)27款新冠抗體檢測(cè)試劑），全國(guó)各地陸續(xù)出現(xiàn)流行病學(xué)史及臨床表現(xiàn)均不支持的IgM單陽(yáng)性個(gè)體（研究已證實(shí)新冠感染者IgM單獨(dú)陽(yáng)性持續(xù)時(shí)間很短[1]），抗體檢測(cè)屢屢出現(xiàn)假陽(yáng)性成為困擾新冠疫情防控的難題，因此有必要正確評(píng)估新冠抗體檢測(cè)在新冠肺炎診斷及疫情防控中的作用，對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行科學(xué)合理的解釋。 1.新冠病毒抗體檢測(cè)必須基于 對(duì)人體新冠病毒免疫應(yīng)答規(guī)律的研究 新冠病毒抗體檢測(cè)必須基于對(duì)人體新冠病毒免疫應(yīng)答規(guī)律的研究新冠病毒(SARS-CoV-2)有四種主要的結(jié)構(gòu)蛋白：刺突蛋白（Spike protein，S蛋白），核衣殼蛋白（Nucleocapsid，N蛋白），膜蛋白（Membrane protein，M蛋白），包膜蛋白（Envelope protein，E蛋白）。 S蛋白是冠狀病毒非常重要的表面蛋白，與病毒的傳染能力密切相關(guān)，S蛋白包含S1、S2和受體結(jié)合域（RBD），N蛋白在冠狀病毒中含量豐富，是一種高度免疫原性蛋白，參與基因組復(fù)制和細(xì)胞信號(hào)通路調(diào)節(jié)，目前S蛋白和N蛋白是新冠免疫檢測(cè)試劑盒關(guān)鍵原材料，由于對(duì)新冠病毒體液免疫應(yīng)答的了解有一個(gè)漸進(jìn)的過(guò)程，國(guó)家藥監(jiān)局初期（2月份）批準(zhǔn)的抗體檢測(cè)試劑（尤其是膠體金快速檢測(cè)試劑）使用的病毒重組蛋白多為新冠病毒N蛋白，而研究發(fā)現(xiàn)[2]N抗原免疫原性很強(qiáng)，但檢測(cè)的靈敏較低，而S抗原對(duì)于早期新冠肺炎的檢測(cè)特異性和靈敏度更好，但是對(duì)于IgM和IgG抗體具有偏向性。其中IgM抗體最好的標(biāo)志物為S1+S2ECD或者S1-RBD蛋白，IgG抗體最好的抗體標(biāo)志物可以是S2ECD和S1+S2ECD蛋白，因此生產(chǎn)商進(jìn)一步優(yōu)化抗體檢測(cè)試劑原料的組成，對(duì)于提高試劑檢測(cè)效能有很大意義。 目前新冠抗體主要采用免疫學(xué)方法檢測(cè)，因此多種因素會(huì)造成對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾，《新型冠狀病毒肺炎診療方案（試行第七版）》也強(qiáng)調(diào)：“由于試劑本身陽(yáng)性判斷值原因，或者體內(nèi)存在干擾物質(zhì)（類風(fēng)濕因子、嗜異性抗體、補(bǔ)體、溶菌酶等），或者標(biāo)本原因（標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、標(biāo)本凝固不全等），抗體檢測(cè)可能會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性。一般不單獨(dú)以血清學(xué)檢測(cè)作為診斷依據(jù)，需結(jié)合流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)和基礎(chǔ)疾病等情況進(jìn)行綜合判斷”。 國(guó)外研究[3]也發(fā)現(xiàn)14.7%的普通感冒患者出現(xiàn)了抗新冠病毒抗體,普通感冒中10%左右為普通冠狀病毒感染，抗體的交叉反應(yīng)是存在的。 3.在新冠肺炎診斷及疫情防控中 正確認(rèn)識(shí)抗體檢測(cè)的意義及局限性 目前國(guó)家藥監(jiān)局已批準(zhǔn)的新冠抗體檢測(cè)試劑都是定性檢測(cè)試劑，原則上不可作為定量試劑檢測(cè)抗體變化。 抗體檢測(cè)試劑說(shuō)明書預(yù)期用途中明確說(shuō)明：抗體檢測(cè)試劑僅用作對(duì)新冠病毒核酸檢測(cè)陰性疑似病例的補(bǔ)充檢測(cè)，或在疑似病例診斷中與核酸檢測(cè)協(xié)同使用，不作為新冠病毒感染者確診和排除的依據(jù)，也不適用于一般人群的篩查，但可用于疫區(qū)等高流行率人群的血清流行病學(xué)調(diào)查，美國(guó)CDC新冠抗體檢測(cè)指南（US CDC Interim Guidelines forSARS-Cov-2 Antibody Testing）建議血清學(xué)檢查結(jié)果不得用于決定要居住或進(jìn)入學(xué)校、宿舍、教養(yǎng)所等人群的鑒別。 建議國(guó)家相關(guān)部門盡快制定新冠病毒抗體檢測(cè)相關(guān)規(guī)范及指南，指導(dǎo)醫(yī)療機(jī)構(gòu)科學(xué)、正確的進(jìn)行新冠抗體的檢測(cè)及篩查。 病毒中和抗體和結(jié)合抗體：中和抗體指與病毒結(jié)合后能消除病毒感染能力的抗體，是機(jī)體抵御病毒入侵的一類免疫球蛋白，并不是抗體檢測(cè)陽(yáng)性，抗體與病毒S1蛋白或者RBD區(qū)結(jié)合就是中和抗體。體內(nèi)是否存在中和抗體需要病毒中和實(shí)驗(yàn)證實(shí)，新冠疫苗接種后常規(guī)抗體檢測(cè)只能確定接種者是否產(chǎn)生了體液免疫應(yīng)答，并不能確定產(chǎn)生的抗體是否具有中和病毒作用。 【參考文獻(xiàn)】 [1]Padoan A, Cosma C, Sciacovelli L et al.Analytical performances of achemiluminescence immunoassay for SARS-CoV-2 IgM/IgG and antibody kinetics.Clin Chem Lab Med 2020; 58(7): 1081–1088 [2]Xiaomei Zhang，Xian Wu，Dan Wang et al.Proteome-wideanalysis of differentially-expressed SARS-CoV-2 antibodies in early COVID-19infection. medRxiv preprint doi: https://doi.org/10.1101/2020.04.14.20064535 |