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肺炎支原體是兒童及青少年社區(qū)獲得性肺炎的重要致病菌之一，由于肺炎支原體感染的臨床癥狀并不典型，無(wú)法與其他肺炎相區(qū)別，因此支原體肺炎的診斷主要靠實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，常用的方法包括：支原體培養(yǎng)、血清學(xué)方法及分子診斷方法。 標(biāo)本采集 采樣時(shí)應(yīng)注意盡量采用帶塑料柄的尼龍拭子、滌綸拭子、植絨拭子或人造棉拭子，而不要采用帶木柄的棉花拭子，因?yàn)楹笳呖赡芎幸种浦гw生長(zhǎng)及抑制分子反應(yīng)的成分。 一、支原體培養(yǎng)
肺炎支原體培養(yǎng)通常采用SP4培養(yǎng)基，有液體和固體兩種。在液體培養(yǎng)基中加有酚紅，肺炎支原體水解葡萄糖使培養(yǎng)基pH值發(fā)生變化從而使培養(yǎng)基顏色發(fā)生變化。在固體培養(yǎng)基上，肺炎支原體呈典型的油煎蛋樣菌落，培養(yǎng)法由于需要時(shí)間較長(zhǎng)，很少用于臨床診斷。
優(yōu)點(diǎn)：1. 特異性高，陽(yáng)性結(jié)果意味著100%的特異性；2. 能獲得致病菌株，可以進(jìn)一步用于分型或藥敏試驗(yàn)；3. 有商品化的培養(yǎng)基（SP4培養(yǎng)基）。
缺點(diǎn)：1. 由于支原體生長(zhǎng)緩慢，培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)，通常需要數(shù)天至數(shù)周；2. 對(duì)操作者技術(shù)要求較高；3. 敏感性較差，培養(yǎng)陽(yáng)性率低。 二、血清學(xué)方法(最常用) 血清學(xué)檢測(cè)方法是肺炎支原體診斷和流行病學(xué)調(diào)查的主要方法，檢測(cè)的抗體包括IgM和IgG兩種。通常在感染后5-7天可以測(cè)到肺炎支原體抗體，3周左右抗體滴度達(dá)到高峰，然后開(kāi)始下降。急性期IgG抗體的陽(yáng)性率低，恢復(fù)期IgG抗體陽(yáng)性率可以達(dá)到82%。同樣，在兒童患者中，急性期IgM抗體的敏感性80.8%，但利用急性期和恢復(fù)期雙份血清檢測(cè)時(shí)，IgM抗體的敏感性可以增加到88.6%。因此單獨(dú)的一次血清學(xué)檢測(cè)存在漏診的風(fēng)險(xiǎn)。通過(guò)急性期IgM檢測(cè)并結(jié)合臨床癥狀進(jìn)行確診，給予患者合理用藥并正確治療。 優(yōu)點(diǎn)：1. 有商品化試劑盒應(yīng)用；2. 可以急性期快速檢測(cè)并結(jié)合臨床癥狀確診；3優(yōu)化治療方案；
缺點(diǎn)：1. 有可能出現(xiàn)假陰性；2. 通常需要結(jié)合臨床癥狀才能確診；3. 部分病人IgM抗體持續(xù)陰性或者IgG抗體持續(xù)增高會(huì)影響診斷。 三、分子診斷方法 最常用的分子診斷方法為PCR技術(shù)，針對(duì)肺炎支原體的ATP酶基因序列，P1粘附素基因序列及16SrRNA的保守區(qū)域等設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增。同時(shí)實(shí)時(shí)定量PCR也可用于肺炎支原體的檢測(cè)，與普通PCR相比，可以縮短樣本周轉(zhuǎn)時(shí)間，減少電泳等步驟。 優(yōu)點(diǎn)：1. 有商品化試劑盒應(yīng)用；2. 高靈敏度高特異性；3. 檢測(cè)速度快，樣本周轉(zhuǎn)時(shí)間短，利于臨床診斷及治療；4. 可以對(duì)支原體菌株進(jìn)行分子分型。 缺點(diǎn)：1. 價(jià)格比較貴；2. 需要特殊的設(shè)備和技術(shù)；3. 檢測(cè)沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)化，缺乏臨床比較驗(yàn)證。 轉(zhuǎn)發(fā)自臨床實(shí)驗(yàn)室 |