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臨床經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)一些病人，傷口出現(xiàn)膿液，通過(guò)臨床即可診斷為感染，但對(duì)膿液送檢微生物培養(yǎng)后卻發(fā)現(xiàn)是無(wú)菌生長(zhǎng)，微生物室應(yīng)該怎么向臨床解釋培養(yǎng)結(jié)果？問(wèn)題出在什么地方了？怎樣能避免這種結(jié)果的出現(xiàn)？就此問(wèn)題我們一起來(lái)探討一番。 膿液是機(jī)體局部炎癥組織壞死的溶解產(chǎn)物。在炎癥過(guò)程中,由于局部血液循環(huán)嚴(yán)重障礙及病原菌的內(nèi)、外毒素作用等,可發(fā)生局部組織營(yíng)養(yǎng)不良及變性,最后導(dǎo)致壞死。壞死組織在細(xì)菌毒素及死亡的白細(xì)胞釋放出的蛋白酶作用下,水解化為膿液。因此膿液中主要由組織分解產(chǎn)物、炎癥滲出物、白細(xì)胞及死亡的細(xì)菌等組成。 人工培養(yǎng)細(xì)菌需要提供充足的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)使細(xì)菌獲得生長(zhǎng)繁殖所需要的原料和能量，除此之外尚要有適宜的環(huán)境條件，如酸堿度、滲透壓、溫度和必要的氣體等。 1）水：細(xì)菌所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)必須先溶于水，營(yíng)養(yǎng)的吸收和代謝均需有水才能進(jìn)行。 2）碳源：病原菌主要從糖類獲得碳，作為合成菌體組分和獲得能量的主要來(lái)源。 3）氮源：主要功能是作為菌體成分的原料，主要從氨基酸、蛋白胨等有機(jī)氮化物獲得。 4）無(wú)機(jī)鹽：構(gòu)成有機(jī)化合物，成為菌體的成分；作為酶的組成部分，維持酶的活性；參與能量的儲(chǔ)存和轉(zhuǎn)運(yùn)；調(diào)節(jié)菌體內(nèi)外的滲透壓。 多數(shù)細(xì)菌在代謝過(guò)程中需要CO2，但分解糖類時(shí)產(chǎn)生的CO2已足夠其所需，且空氣中還有微量CO2，不必額外補(bǔ)充，只有少數(shù)菌如布魯菌、腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等必須在5%-10%CO2環(huán)境中才能生長(zhǎng)。 答案顯然是否定的，膿液的成份不能滿足微生物生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)要求，如果再?zèng)]有及時(shí)進(jìn)行送檢，陽(yáng)性結(jié)果基本就跟我們說(shuō)拜拜了。 1.首先，任何標(biāo)本都應(yīng)在應(yīng)用抗生素之前進(jìn)行采樣；采樣前可用無(wú)菌生理鹽水清洗病灶表面的污染雜菌，采集后立即送檢。 2.對(duì)已破潰膿腫一般以無(wú)菌棉拭采取病灶深部的分泌物，置入無(wú)菌試管中送檢；對(duì)未破潰的膿腫可嚴(yán)格消毒后，以無(wú)菌注射器抽取膿汁，也可切開(kāi)排膿用無(wú)菌棉拭子采取深部的分泌物。 3.對(duì)瘺管的標(biāo)本，常用無(wú)菌棉拭子擠壓，選取膿汁中“硫磺樣顆�！盵注]，置于無(wú)菌管中送檢。 1.檢驗(yàn)項(xiàng)目 膿汁和創(chuàng)面分泌物的細(xì)菌培養(yǎng)、真菌培養(yǎng)、一般細(xì)菌涂片、真菌涂片、結(jié)核菌涂片。 物品準(zhǔn)備與檢驗(yàn)申請(qǐng) 2.1 領(lǐng)取無(wú)菌試管或無(wú)菌拭子。請(qǐng)拿檢驗(yàn)申請(qǐng)單到病房二樓細(xì)菌室登記領(lǐng)取。 2.2 填寫檢驗(yàn)申請(qǐng)單。用鋼筆填寫，字跡清楚，填寫完整。 標(biāo)本采集 3.1 采集指征 3.1.1 癥狀指征：①局部癥狀：紅、腫、熱、痛和功能障礙是化膿性感染的五個(gè)典型特征。但隨病程遲早、病變范圍、位置深淺，五個(gè)癥狀不一定全部表現(xiàn)。病變范圍小或位置較深時(shí)，局部癥狀可不明顯。②全身癥狀：輕重不一。感染較重者常有發(fā)熱、頭痛、全身不適、乏力食欲減退等，一般均有白細(xì)胞計(jì)數(shù)增加和核左移。病程較長(zhǎng)時(shí)，可有水和電解質(zhì)紊亂，血漿蛋白減少，肝糖原大量消耗，可出現(xiàn)營(yíng)養(yǎng)不良、貧血、水腫等癥狀。全身性感染嚴(yán)重的病人可發(fā)生感染性休克。 3.1.2 疾病指征：①軟組織的急性化膿性炎癥：如癤、癰、急性蜂窩織炎、丹毒等。②化膿性疾�。喝缂诇涎�、化膿性關(guān)節(jié)炎、化膿性骨髓炎、氣性壞疽、細(xì)菌性結(jié)膜炎、鼻竇炎、化膿性扁桃體炎、急性化膿性中耳炎、急性化膿性乳突炎、急性乳房炎、急性膽囊炎、急性梗阻性化膿性膽管炎、心包炎、結(jié)核性腹膜炎。③膿腫：扁桃體膿腫、咽部膿腫、咽旁膿腫、腦膿腫、肺膿腫、肝膿腫、膿胸、腹腔膿腫、腎皮質(zhì)化膿性感染、腎周圍炎和腎周膿腫、直腸肛管周圍膿腫。④創(chuàng)傷感染：術(shù)后切口感染、導(dǎo)管感染、臍帶殘端感染。 采集方法 3.2.1 開(kāi)放膿腫用無(wú)菌生理鹽水擦洗病灶表面后，用蘸有無(wú)菌生理鹽水的滅菌拭子采取膿液和病灶深部的分泌物，置無(wú)菌試管內(nèi)送檢。注意盡量取化膿組織與正常組織交界處的膿汁，因?yàn)槟撝行牡募?xì)菌大部分已死亡，交界處的活菌較多，會(huì)提高陽(yáng)性率。 3.2.2 閉鎖膿腫一般采用穿刺或手術(shù)引流的方法采取。采集前先用2.5-3%的碘酊和75%的酒精消毒周圍皮膚后，用無(wú)菌注射器抽取膿液送檢；也可于切開(kāi)排膿時(shí)用無(wú)菌棉拭子采樣。 3.2.3 燒傷傷口 先清創(chuàng)，出現(xiàn)滲出物后用拭子用力采集病灶基底部或邊緣的標(biāo)本。也可送組織標(biāo)本。 3.2.4 膿皰或水皰 用酒精進(jìn)行表面消毒，待消毒液干燥，用針頭（小兒用23號(hào)針頭）挑破膿皰，用拭子采集膿皰液和基底部標(biāo)本。 3.2.5 注意事項(xiàng)：①采樣前病灶局部應(yīng)避免用抗菌藥物或消毒劑，應(yīng)在用藥之前采取。②對(duì)大多數(shù)開(kāi)放傷口，采集前應(yīng)先清創(chuàng)，去除表面菌群。③除非有滲出物，干燥、結(jié)痂傷口取材一般不做培養(yǎng)。④閉合膿腫應(yīng)取滲出物和膿腫壁標(biāo)本，不能用拭子采集。開(kāi)放膿腫處理同開(kāi)放傷口。⑤不要僅僅送檢膿液，應(yīng)在病灶活動(dòng)區(qū)域或基底部采集標(biāo)本，最好是組織標(biāo)本。 標(biāo)本運(yùn)送和驗(yàn)收 4.1 標(biāo)本采集后應(yīng)盡快送檢，如果在1h內(nèi)不能培養(yǎng)，應(yīng)將標(biāo)本4℃冷藏（培養(yǎng)淋病奈瑟菌和腦膜炎奈瑟菌的標(biāo)本除外） 4.2 送檢地點(diǎn)：檢驗(yàn)科細(xì)菌室或急診檢驗(yàn)科 4.3 標(biāo)本驗(yàn)收與拒收:①檢查盛裝標(biāo)本的容器是否符合無(wú)菌要求，是否有滲漏、破裂或明顯污染；②檢查盛裝標(biāo)本的容器標(biāo)簽與申請(qǐng)單是否相符，送檢目的不要只寫“傷口”應(yīng)注明解剖來(lái)源及來(lái)自閉合傷口還是開(kāi)放傷口；③檢查標(biāo)本是否適量，是否及時(shí)送檢。送檢時(shí)間過(guò)長(zhǎng)者應(yīng)拒收。④標(biāo)本涂片革蘭染色若發(fā)現(xiàn)上皮細(xì)胞，提示標(biāo)本已被污染，一般不適合再做培養(yǎng)。 參考文獻(xiàn)： [1]李凡,劉晶晶.醫(yī)學(xué)微生物學(xué)[M].北京.人民衛(wèi)生出版社,2010:150-153 本文轉(zhuǎn)載自臨床實(shí)驗(yàn)室 |