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我們知道，尿液有形成分檢查離不開應(yīng)用顯微鏡。自從廣泛使用顯微鏡技術(shù)檢查尿液以來，對尿液的形態(tài)學(xué)研究已經(jīng)有了明顯的進(jìn)展�，F(xiàn)代顯微鏡檢查技術(shù)已經(jīng)不僅限于使用光學(xué)顯微鏡檢查，顯微鏡檢查技術(shù)可以使得進(jìn)行腎臟疾病研究的腎臟病學(xué)家和檢驗專業(yè)人員，利用各種顯微鏡光學(xué)技術(shù)輕易識別尿沉渣中的各種成分�，F(xiàn)代多功能顯微鏡均可選擇多種視場照明模式，我們應(yīng)該了解他們不同的特點，正確使用。 現(xiàn)代高端的多功能顯微鏡往往會配備不同的組件來處理我們所需要研究和鑒別的成分，這樣我們可以在同一個視野下，通過切換不同的光源組件進(jìn)行照明，來達(dá)到觀察和鑒別的目的�？梢允沟醚芯磕I臟病的專業(yè)人士能夠使用各種照明技術(shù)輕易地識別尿沉渣的成分。而同時配合有顯微鏡數(shù)字相機時，更可以將所發(fā)現(xiàn)和觀察到的形態(tài)學(xué)成分，在不同照明光源條件下拍攝和記錄下來，方便進(jìn)行對比研究與分析。本文對尿液有形成分檢查常用的幾種照明技術(shù)進(jìn)行介紹，以便大家學(xué)習(xí)和了解，充分發(fā)揮顯微鏡的特殊功能。
2.暗視野：檢驗專業(yè)領(lǐng)域所指的暗視野顯微鏡，是采用暗場（Dark-field）照明技術(shù)（圖2），在大多數(shù)顯微鏡上也可用，在多功能顯微鏡下面的聚光鏡中安裝有一個不透明的暗視野盤片。在這種模式下，只有來自光源的周邊的光聚焦在樣本上，在黑暗背景下產(chǎn)生明亮的圖像。高折射率沉淀物中的晶體和脂類等成分在暗場照明條件下顯得格外“明亮”。使用暗視野功能應(yīng)將聚光鏡轉(zhuǎn)盤設(shè)置為“DF”模式。
3.相位差：顯微鏡如果具有相位差（Phase contrast）功能，通過在聚光鏡中使用“相位環(huán)（“phase annulus）”和物鏡中使用反向“相位板（phase plate）”來改變光的路徑（圖3）。這種效果會增強物體邊緣和低折射率元素的對比度（如管型中的透明蛋白基質(zhì)）。這種成像方式需要一個裝有特殊聚光鏡和特殊相位對比物鏡的顯微鏡。根據(jù)使用的物鏡，將聚光鏡上的轉(zhuǎn)換盤設(shè)置為“Ph1、Ph2或Ph3”模式即可。
4.偏振光：在使用偏振光顯微鏡中（圖4），將一個偏光濾光片（偏光鏡）放在聚光鏡下面，另一個（偏光鏡）放在樣品上方的光路中（通常在物鏡和觀察鏡之間的特定位置插入）。當(dāng)將位于下面聚光鏡上的偏振光鏡片相對于插入到上面的偏光鏡片進(jìn)行旋轉(zhuǎn)，當(dāng)旋轉(zhuǎn)90°時，所有偏振光被阻擋，圖像背景看起來非常暗。光穿過載玻片上的各類具有屈光差的物體（如脂類、晶體和各種干擾成分）可呈現(xiàn)出雙折射現(xiàn)象，這意味著光在兩個方向上折射。額外的折射光能夠通過顯微鏡的光學(xué)分析，從而在原本黑暗的背景下形成對比鮮明的物體。換句話說，圖像對比度是由平面偏振光與雙折射（或雙重折射）樣品相互作用產(chǎn)生的，產(chǎn)生兩個單獨的波分量，每個分量在相互垂直的平面上起偏振。
通過偏振光顯微鏡鏡檢技術(shù)很容易鑒別脂類、晶體和污染物，如淀粉和合成纖維。某些脂類顯示出一種特征性的“馬耳他十字（maltese cross）”現(xiàn)象，這種模式對于鑒別尿液中的脂質(zhì)非常有用（圖6）。
注：本文來源于《臨床實驗室》雜志2021年第4期“臨床檢驗”專題 |
