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本文轉(zhuǎn)載自定向點(diǎn)金 金寶 陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥（PNH） 陣發(fā)性血紅蛋白尿 骨髓造血功能衰竭和靜脈血栓的形成。 流式細(xì)胞術(shù)（FCM） 檢測(cè)不同血細(xì)胞群體GPI錨連蛋白及錨的缺失 精確量化PNH克隆的大小及其特性 PNH小克隆的檢出具有較高的靈敏度，成為當(dāng)前PNH檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)。 篩查PNH克隆的臨床適應(yīng)證 經(jīng)典PNH：存在PNH克隆 有溶血和（或）血栓的臨床表現(xiàn) 其他骨髓衰竭性疾�。˙MF） BMF伴PNH克隆 如再生障礙性貧血（AA）或骨髓增生異常綜合征（MDS）等 亞臨床型PNH 少量或微量PNH克隆，但沒有溶血或血栓形成的臨床或?qū)嶒?yàn)室證據(jù)。 FCM檢測(cè)紅細(xì)胞PNH克隆 抗體選擇 儀器設(shè)置 PNH-FCM檢測(cè)的特殊點(diǎn)在于檢測(cè)的目的細(xì)胞是錨連蛋白和GPI錨蛋白陰性的細(xì)胞群。 制備、細(xì)胞獲取、設(shè)門和分析 紅細(xì)胞檢測(cè)不需要溶血，但要防止紅細(xì)胞聚集。 由于蛋白質(zhì)會(huì)引起紅細(xì)胞聚集。 FCM檢測(cè)白細(xì)胞PNH克隆 白細(xì)胞是檢測(cè)PNH克隆大小最精準(zhǔn)的目標(biāo)細(xì)胞，用于確定疾病的發(fā)展程度。 抗體選擇 檢測(cè)白細(xì)胞GPI相關(guān)錨蛋白最好的試劑為嗜水氣單胞菌溶素變異體（FLAER），應(yīng)選擇適當(dāng)?shù)腻^連蛋白抗體同時(shí)與FLAER及設(shè)門抗體聯(lián)合應(yīng)用。 設(shè)門抗體的選擇 CD15是粒細(xì)胞通用的抗體。 對(duì)于單核細(xì)胞的設(shè)門標(biāo)志的選擇國(guó)際上推薦CD64 主要原則同紅細(xì)胞，注意選擇TIME參數(shù)及FSC及SSC信號(hào)均選擇線性模式。 PNH克隆高靈敏度檢測(cè) 臨床意義 由于部分患者出現(xiàn)血管內(nèi)溶血，使得紅細(xì)胞的PNH克隆比例往往比實(shí)際低，不能真實(shí)反映疾病程度。 白細(xì)胞PNH克隆比例尤為重要。 高靈敏度FCM可以發(fā)現(xiàn)PNH小克隆、識(shí)別PNH表型特點(diǎn)。 量化克隆的大小以及明顯降低假陽(yáng)性率。 影響靈敏度因素 高靈敏度PNH克隆檢測(cè)時(shí)，獲取的細(xì)胞數(shù)、檢測(cè)的背景值及儀器的潔凈度等決定檢測(cè)的敏感度。 如何避免假陽(yáng)性 導(dǎo)致假陽(yáng)性的原因主要有：紅細(xì)胞碎片、非特異性染色、自發(fā)熒光、攜帶污染及錯(cuò)誤數(shù)據(jù)的出現(xiàn)。 通過(guò)獲取足夠多的細(xì)胞，結(jié)合細(xì)胞表型特征和多參數(shù)分析可以增加門內(nèi)細(xì)胞的純度而避免假陽(yáng)性的產(chǎn)生。 結(jié)果分析和解讀 雖然紅細(xì)胞檢測(cè)能明確具體是哪型GPI缺失，但缺失的百分比和臨床表現(xiàn)的關(guān)系尚未明確。 值得一提的是：隨著依庫(kù)珠單抗（eculizumab）在臨床的使用，紅細(xì)胞 PNH檢測(cè)也能用來(lái)監(jiān)測(cè)其治療效果。 室內(nèi)與室間質(zhì)控 目前缺乏相應(yīng)的商品化室內(nèi)質(zhì)控物； 國(guó)內(nèi)臨床檢驗(yàn)中心也未開展相關(guān)的室間質(zhì)評(píng)； 專家共識(shí)建議由開展PNH流式檢測(cè)的區(qū)域中心單位牽頭進(jìn)行室間比對(duì)。 1 以下為原文
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