本文轉(zhuǎn)載自檢驗(yàn)星空
熒光素染色和普通染料染色法主要不同點(diǎn)就是熒光素染色法敏感性高,抗酸分支桿菌能與熒光染料金胺“O”結(jié)合,而金胺“O”是一種能產(chǎn)生強(qiáng)熒光的熒光色素,并具有選擇性,結(jié)核菌是帶有陰電荷的微生物,而熒光色素金胺“O”是一種含有自由氨基的金黃色堿性染料,它的離子帶有陽(yáng)電荷,因此金胺“O”能和帶陰電荷的抗酸桿菌結(jié)合而著色,在熒光顯微鏡中的高壓汞燈的紫藍(lán)光照射激發(fā)下,使帶金胺“O”染色的結(jié)核菌發(fā)出很強(qiáng)的桔黃色熒光,檢查時(shí)用高倍鏡即可查見(jiàn)明亮細(xì)菌。1.金胺“O”基礎(chǔ)液:取金胺“O”1.0g溶于95%乙醇100ml中,置褐色瓶中可長(zhǎng)期保存。 2.金胺“O”應(yīng)用液:取上述基礎(chǔ)液10ml加5%石炭酸液90ml,傾入褐色瓶中可保存兩周。 3.3%鹽酸酒精脫色劑:取75%酒精97ml加入3ml濃鹽酸。 4.酸性復(fù)紅溶液:取酸性復(fù)紅1.0g加冰醋酸1ml再加蒸餾水500ml。用于結(jié)核標(biāo)本的快速檢驗(yàn)和其它抗酸菌的鑒定。將固定好的涂片加金胺“O”應(yīng)用液染5分鐘,水洗后加鹽酸酒精脫色20秒鐘,水洗后加酸性復(fù)紅復(fù)染30秒鐘,然后水洗,自然干后鏡檢。用高倍熒光鏡觀察(10×40)要求24小時(shí)內(nèi)鏡檢完畢,延長(zhǎng)時(shí)間,熒光亮度下降,影響檢出陽(yáng)性結(jié)果,結(jié)核桿菌發(fā)黃綠色熒光,亮度清晰,邊緣清楚輪廓正整,菌體典型,細(xì)長(zhǎng)微彎色條均勻。其它物質(zhì)及細(xì)菌絕大多數(shù)不著熒光,但也有少數(shù)著熒光物質(zhì)呈逗點(diǎn)狀熒光,亮度明暗不均,不規(guī)則,邊緣不正齊,易與抗酸菌區(qū)別。
