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本文轉(zhuǎn)載自檢驗(yàn)星空 關(guān)于出凝血樣本的離心時(shí)間和速度，是一個(gè)經(jīng)常被討論，但亦可能會(huì)被忽視的問(wèn)題。為什么要離心？一是分離血漿；二是獲得乏血小板血漿。 這里就提到了凝血體外檢測(cè)用到的標(biāo)本要求了，小編翻了翻試劑說(shuō)明書，感興趣的同學(xué)也可以自行查閱： APTT：【樣本要求】取9體積新鮮靜脈血與1體積枸櫞酸三鈉混合，充分抗凝。參照NCCLS文H21-A3項(xiàng)下關(guān)于樣本收集、處理與存儲(chǔ)說(shuō)明。 PTRP：【標(biāo)本處理】室溫下，1,500g離心不少于15min，分離獲得乏血小板血漿（血小板計(jì)數(shù)<10×109）待檢。 TT：【標(biāo)本處理】室溫下，1,500g離心不少于15min，分離獲得乏血小板血漿（血小板計(jì)數(shù)<10×109）待檢。 FIB-C：【樣本要求】取9體積新鮮靜脈血與1體積枸櫞酸三鈉混合，充分抗凝。參照NCCLS文H21-A3項(xiàng)下關(guān)于樣本收集、處理與存儲(chǔ)說(shuō)明。 NCCLS就是CLSI臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)的前身，關(guān)于APTT和FIB-C在里面有專門的項(xiàng)去規(guī)定，分別是H47和H30，所以可能說(shuō)明書直接引用了： H21-A3是1998年版本，2003年更新了A4，舊版本規(guī)定血小板計(jì)數(shù)小于10×109/L的血漿可以用于常規(guī)血凝試驗(yàn)（APTT、用于非肝素化病人的PT/INR和凝血酶時(shí)間）； 新版本H4規(guī)定：血小板計(jì)數(shù)大于10×109/L的血漿可能并不適合另外一些凝集試驗(yàn)（如狼瘡抗凝、磷脂抗體和肝素監(jiān)控試驗(yàn)等）。 細(xì)心的同學(xué)發(fā)現(xiàn)了，上面的要求都提到了血小板計(jì)數(shù)，是不是搞懂了這個(gè)就明白了離心時(shí)間呢？
知彼知己，方可胸有成竹，經(jīng)過(guò)了NCCLS標(biāo)準(zhǔn)的不斷普及，咱們自己也根據(jù)實(shí)際情況有了自己的標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)程。 衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T 359-2011文件，6.1標(biāo)本的準(zhǔn)備中有寫：在分離血漿時(shí)，將裝有標(biāo)本的帶蓋試管在規(guī)定的速度和時(shí)間條件下(室溫、1500g、不少于15min)離心，以得到乏血小板血漿(血小板計(jì)數(shù)(<10×109/L)。離心機(jī)應(yīng)使用甩平式轉(zhuǎn)頭以減少血漿和血小板的重新混合。 在《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第4版），第四章第一節(jié)《血栓與止血檢驗(yàn)標(biāo)本的采集和處理》描述：“缺乏血小板的血漿（PPP）可用于大多數(shù)的凝血試驗(yàn)，制備必須在大于或等于每分鐘3000轉(zhuǎn)條件下離心15分鐘�！� 第四章第五節(jié)《凝血因子的檢驗(yàn)》中對(duì)APTT的試劑器材要求：“以109mmol/L枸櫞酸鈉溶液作1:9抗凝，3000r/min離心10分鐘，獲貧含血小板血漿，應(yīng)使用塑料試管，防止血小板激活�！� 統(tǒng)一要求了！看來(lái)這制約離心時(shí)間得到血漿的阻礙者就是血小板了！ 其實(shí)了解了凝血過(guò)程下各凝血因子的途徑就好明白為什么要使用乏血小板血漿了，都因?yàn)榱字?/span> 我們使用的血凝試劑如APTT，PT成分便有合成磷脂，通過(guò)血漿和體外磷脂孵育，在激活劑和Ca離子觸發(fā)下，進(jìn)行凝血過(guò)程。 而血小板上有磷脂，要消除；活化的血小板還會(huì)釋放綜合肝素的血小板IV因子，影響抗凝檢測(cè)，要消除；同時(shí)20%的V因子來(lái)源于血小板，影響測(cè)定時(shí)間，要消除；最常見(jiàn)的狼瘡抗凝物會(huì)和血小板磷脂結(jié)合，導(dǎo)致假陰性，同時(shí)減少APTT時(shí)間，有實(shí)驗(yàn)顯示，非標(biāo)準(zhǔn)乏血小板血漿情況下，中度狼瘡抗凝物質(zhì)存在會(huì)減少10sAPTT，要消除。 所以嚴(yán)格的離心力和離心時(shí)間就是為了得到上層乏血小板血漿，確保沒(méi)有自身磷脂的干擾，得到最最準(zhǔn)確的結(jié)果。 好了，了解完了各大標(biāo)準(zhǔn)15min刷屏和乏血小板血漿的重要性，大家應(yīng)該知道凝血標(biāo)本該離心幾分鐘了吧。 來(lái)源：太原維康 |
