免疫實(shí)驗(yàn)室專業(yè)組長及工作人員全自動微粒子化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)Access 鐵蛋白檢測采用雙位點(diǎn)酶免法檢測 (“雙抗體夾心法”)。樣品、標(biāo)記了堿性磷酸酶的羊抗鐵蛋白抗體(酶結(jié)合物)以及包被了羊抗大鼠、大鼠抗鐵蛋白抗體復(fù)合物的磁性顆粒被一起加入到反應(yīng)管中,樣品中的鐵蛋白和固相在磁性顆粒表面的抗體以及游離的酶結(jié)合物在不同的抗原位點(diǎn)上同時發(fā)生反應(yīng)。而后,反應(yīng)管被傳送到磁性分離區(qū)域進(jìn)行多次沖洗,去處未和固相結(jié)合的其它成分。最后在反應(yīng)管中加入化學(xué)發(fā)光底物(Lumi-Phos* 530), 已與固相結(jié)合的堿性磷酸酶會使該底物發(fā)出光子并被光電比色計所檢測。最后,對照儀器中儲存的多點(diǎn)定標(biāo)曲線中所描述的光量子與標(biāo)準(zhǔn)品鐵蛋白的對應(yīng)關(guān)系而計算出樣品中的鐵蛋白濃度,反應(yīng)產(chǎn)生的光子與樣品中鐵蛋白的含量成正比。1、最好使用新鮮血清樣本,如需保存,可置2-8℃冷藏48小時或-20℃冷凍4周。2、避免使用溶血、渾濁或脂血樣本及反復(fù)凍融樣本。鐵蛋白的定標(biāo)品提供了六個濃度,0和大概10, 50, 200, 500, a1500 ng/ml (mg/l) ,由人肝臟鐵蛋白通過稱重法參考WHO第一屆國際標(biāo)準(zhǔn)委員會對于鐵蛋白標(biāo)準(zhǔn)品的要求(IRP 80/578)配置而成。定標(biāo)曲線有效期為28天。1.在裝入儀器前,將試劑輕輕的顛倒混勻幾次,不要顛倒已用試劑,通過輕輕旋轉(zhuǎn)的方式混勻試劑。2.每次測試使用25mI的樣品,但要考慮到樣品杯和樣品管的死體積。3.樣品可在可報告范圍內(nèi)被準(zhǔn)確的定量(可報告范圍約為0.2-1500 ng/ml)。如果樣品中的含量超過可報告范圍上限時,報結(jié)果為> 1500 ng/ml,如果樣品濃度低于檢測線性的低值,報告結(jié)果為<0.2 ng/ml。4.不要重新使用在儀器內(nèi)已存放1小時以上的標(biāo)本進(jìn)行檢測。5.結(jié)果應(yīng)與病人所有的臨床表現(xiàn)聯(lián)系在一起,包括臨床病史,其它檢測結(jié)果和其它合適信息血清鐵蛋白是體內(nèi)含鐵量最豐富的一種蛋白質(zhì),分子量約450Kd,其中含鐵17-23%,是鐵的主要儲存形式之一,幾乎所有真核細(xì)胞都含有鐵蛋白。Fe2+在腸黏膜細(xì)胞內(nèi)氧化成三價,刺激核糖體合成無鐵鐵蛋白,并與腸黏膜中的Fe3+結(jié)合形成鐵蛋白,儲存在肝、脾、骨髓及腸黏膜細(xì)胞中,是網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)儲鐵的主要形式,周圍血中循環(huán)鐵蛋白則來自網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的主動分泌或網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞死亡的被動釋放。測定血清鐵蛋白是判斷體內(nèi)鐵儲存量的重要指標(biāo)。在診斷缺鐵性貧血。鐵負(fù)荷過度,營養(yǎng)狀況調(diào)查都有血清鐵增高重要意義,同時鐵蛋白作為一種腫瘤標(biāo)志物,如原發(fā)性肝癌、肺癌、白血病等,對臨床某些惡性腫瘤的診斷也具有一定的價值。