隨著核酸檢測大規(guī)模的應(yīng)用，其檢測原理和概念也越來越被社會熟知。近期小編發(fā)現(xiàn)，部分科普文中出現(xiàn)“若Ct值大于35，理論上起始模板拷貝數(shù)小于1，可認為檢測結(jié)果無意義”的說法，這種說法是否正確呢？回答這個問題之前，小編想再次談?wù)労怂釞z測中Ct值的應(yīng)用及其局限性。

有關(guān)部分原理和概念可翻閱本公眾號前期推送，這里我們再簡單描述一下Ct值的概念，即循環(huán)閾值數(shù)（Cycle threshold）：是指反應(yīng)管內(nèi)的檢測熒光信號強度大于所設(shè)定的熒光閾值時的擴增循環(huán)數(shù)，其代表的是檢測到的熒光信號強度高于最小檢測水平（即熒光閾值）時的PCR循環(huán)數(shù)，其計算方法是坐標軸中擴增曲線和閾值線的交點對應(yīng)的X軸的值。

Ct值的大小代表樣本中核酸含量的多少，即Ct值越小，樣本中核酸含量越多，Ct值越大，樣本中核酸含量越少。核酸擴增檢測作為指數(shù)級別的擴增，在理想的條件下，樣本中核酸起始濃度的Log值與Ct值呈線性關(guān)系，所以當(dāng)獲得未知樣本中的Ct值，就可以通過標準曲線（已知濃度的標準品同時擴增）計算出標本中的核酸濃度。用數(shù)學(xué)表達式可以簡單表示為二元一次方程即Ct =k lgX₀ + b（k，b為常數(shù)，X₀代表核酸起始濃度），當(dāng)擴增效率為100%，Ct值增加1時表示濃度降為原來的1/2，Ct值增加2時濃度降為原來的1/4，Ct值增加3.32（2^3.32=10）時濃度降為原來的1/10。當(dāng)然，對于部分臨床檢測項目，不需要計算樣本中的核酸濃度，只需要根據(jù)Ct值得到定性的檢測結(jié)果即可。

“若Ct值大于35，理論上起始模板拷貝數(shù)小于1，可認為檢測結(jié)果無意義”的說法很顯然是不準確的。

說到這里，許多讀者會有疑問，Ct值到底應(yīng)該是多少？答案是不一定，因為不同檢測系統(tǒng)的總循環(huán)數(shù)和陽性判斷值不同。其次許多病原體感染屬于自限性疾病，即機體可以通過免疫調(diào)節(jié)逐漸恢復(fù)并痊愈的過程，病原體在人體中的載量是一個變化的過程，從感染到恢復(fù)的過程，人體中的病原體載量可以簡單理解為先升高再降低。以新冠病毒核酸檢測為例，某樣本的Ct值為38時，感染者可能是感染初期，也可能是恢復(fù)期；再比如，在基于PCR技術(shù)的部分腫瘤基因突變檢測中，還會使用ΔCt值（即靶基因Ct值和外控管Ct值的差值）的概念來輔助判斷檢測結(jié)果。所以不論檢測出的Ct值為多少，都是具有一定臨床意義的。

根據(jù)Ct值的計算方法，基線和閾值線的改變會直接影響Ct值的大小，所以即使相同的樣本，同一檢測人員使用相同的儀器連續(xù)檢測2次，也幾乎無法得到相同的Ct值。其次在臨床檢測中，檢測結(jié)果即擴增曲線也會受到檢測全過程中各個要素的影響，包括檢測前樣本采集、運輸和保存等，檢測中的性能評估、人員操作、試劑儀器等，檢測后的結(jié)果分析等，所以單獨2次實驗得到的Ct值幾乎不具有可比性。如果要進行量化比較，就需要按照定量檢測方法設(shè)置同批次標準品進行檢測或跟蹤Ct值的變化趨勢。

綜上，拋開檢測項目、檢測系統(tǒng)、報告方式和臨床價值，單獨的談?wù)揅t值的大小毫無意義。在核酸檢測中，Ct值是幫助檢測人員得到準確檢測結(jié)果的重要參數(shù)但不是唯一參數(shù)，所以檢測人員需要充分、正確地認識這一參數(shù)，不應(yīng)“唯Ct值論”。