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RPR 又稱為快速血漿反映素環(huán)狀卡片實驗。人體在感染了梅毒螺旋體后，梅毒螺旋體自身以及機體內被損害的細胞可以釋放出類脂質物質，這些類脂質物質引發(fā)機體免疫應答產生抗脂質抗體，人工合成的心磷脂、卵磷脂和膽固醇混合抗原可以與抗脂質抗體發(fā)生肉眼可見的凝集反應，而且凝集反應的強度還與機體內的抗脂質水平成正比。 在梅毒診療中 RPR（當然還有其他非特異性抗體檢測方法，本實驗室采用的是 RPR，故以此為例）是具有重要價值的。因此實驗室提供準確的檢測結果尤為重要。那些 RPR 操作過程中可能導致結果錯誤的環(huán)節(jié)，你是否還傻傻的分不清呢？ 1 、RPR 可以檢測腦脊液標本么？ 不可以！RPR 雖然是改良版的 VDRL，但是如果要檢測腦脊液中的梅毒螺旋體非特異性抗體則不能使用 RPR 試劑，應該是用 VDRL - 腦脊液檢測試劑。如果誤用 RPR 試劑檢測了腦脊液樣本，無論結果陰性還是陽性，都不能采用。 不可以！單獨就檢測而言 RPR 既可以檢測血清中的梅毒螺旋體非特異性抗體也可以檢測血漿中的梅毒螺旋體非特異性抗體。但是對于梅毒患者而言，RPR 檢測往往需要動態(tài)監(jiān)測其結果的變化，而血漿檢測結果又明顯高于血清檢測結果，如果前后兩次采用了不同類型樣本，則容易導致前后結果無法比較。 這也是提醒檢驗工作者在發(fā)局 RPR 報告時，應該仔細核對樣本類型，當前后兩次 RPR 檢測結果出現矛盾時，樣本類型也是要考慮的因素之一。 3、 乳糜血可用以 RPR 檢測么？ 不可以！乳糜血的處理有很多方法，我們實驗室采用的是高速離心分離法，乳糜血經高速離心后，吸取下層清亮部分用于 RPR 檢測。 4、 2~8 度保存的血清直接用以 RPR 檢測？ 不可以！RPR 實驗對溫度要求還是很嚴格的，無論是試劑，還是樣本，甚至于實驗環(huán)境都應該是在 18~29 度的室溫下。溫度過低（比如冰箱冷存的血樣沒有室溫放置 30 分鐘而直接加樣進行 RPR 檢測）會怎樣呢？當然是可能造成結果假陽性。 5 、RPR 試劑搖勻即可用于實驗？ 不可以！RPR 抗原試劑混勻是實驗的關鍵。因此推薦在滴加抗原前首先水平旋轉混勻，然后用滴針輕輕地反復吹吸混勻。 不可以！用滴針滴加抗原時，第一滴要棄去不用，從第二滴開始加。滴加抗原時，不是用力擠出的，是把滴針垂直憑借自由落體運動方式滴加的，否則會倒是抗原滴加過量。 7、 能用移液器滴加抗原么？ 不推薦！很多人習慣 ELISA 的操作后液誤以為 RPR 試劑的一滴抗原液應該是 50 uL 左右，其實不然，RPR 試劑盒中，滴針垂直向下以自由落體運動方式滴加的一滴抗原只有約 17 uL。 8、 用移液頭在反應圈涂勻血清時要注意什么？ 傾斜移液頭避免尖端劃破反應圈上的防水層。 9 、能用蒸餾水稀釋血清么？ 不能！應該用無菌生理鹽水作為稀釋液。 10 、滴加抗原后能用振蕩器么？ 不能！應該用水平旋轉儀，100 r/m，8 分鐘。振蕩器一般速度較快，對凝集反應存在干擾，較快的震蕩速度容易導致抗原抗體復合物解離而造成假陰性，而且容易使液體震蕩到反應圈外。 11、8 分鐘后要不要立即判定結果？ 應該立即判定結果。RPR 實驗與 TPPA 不同，TPPA 在 3 小時后結果是穩(wěn)定的，可以次日判定結果，但是 RPR 檢測結果應該在旋轉結束后 3 分鐘以內判讀。否則液容易產生假陽性。 不可以！雖然 RPR 是改良版的 VDRL，但是 RPR 因為添加了黑色碳顆粒，其檢測結果只能是強光下的肉眼判讀。不能顯微鏡下觀察。 13 、實驗完成后，反應板放入試劑盒一同收入冰箱冷存？ 不可以！在開封后，RPR 試劑是需要冷存的，但是反應板應該放在干燥干凈的地方保存。 |