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【案例】 患者女,38歲,腦脊液常規(guī)細(xì)胞計數(shù)(cerebrospinal fluid cell count)白細(xì)胞為:0,而腦脊液細(xì)胞學(xué)分類0.5ml收集,白細(xì)胞總數(shù)為:20:淋巴細(xì)胞16%,激活淋巴細(xì)胞2%,單核細(xì)胞6%,激活單核細(xì)胞11%,中性粒細(xì)胞64%,吞噬細(xì)胞1%。腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查以中性粒細(xì)胞為主的急性炎癥反應(yīng),伴有單核細(xì)胞激活現(xiàn)象,支持顱內(nèi)感染。如何看待腦脊液常規(guī)細(xì)胞計數(shù)與細(xì)胞學(xué)分類結(jié)果之間的矛盾呢? 【解析】 腦脊液白細(xì)胞計數(shù)對于各種中樞神經(jīng)細(xì)胞疾病的診斷和治療監(jiān)測具有十分重要的意義。正常腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查僅見少量淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞,二者比例約為 3:2。在許多情況下會出現(xiàn)腦脊液白細(xì)胞增多,包括感染(病毒,細(xì)菌,真菌,寄生蟲)、過敏、白血病、多發(fā)性硬化癥、出血、腦炎、和吉蘭-巴雷綜合征。白細(xì)胞分類有助于區(qū)分這些原因。例如,病毒感染通常是在淋巴細(xì)胞的增加有關(guān),而細(xì)菌和真菌感染與中性粒細(xì)胞增加有關(guān)[1]。正常腦脊液中并不出現(xiàn)中性粒細(xì)胞,中性粒細(xì)胞的出現(xiàn)為活動性炎癥、急性壞死或活動性血管炎的重要提示。如淋巴細(xì)胞比例升高 和(或)出現(xiàn)激活淋巴細(xì)胞,則提示淋巴細(xì)胞性炎癥。 臨床實驗室一直采用手工計數(shù),實驗周期長,且影響計數(shù)準(zhǔn)確性的因素較多[2]。腦脊液標(biāo)本質(zhì)量會影響細(xì)胞計數(shù)的準(zhǔn)確性。腦脊液離體后,白細(xì)胞會自溶,中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞因富含溶酶體更易自溶,白細(xì)胞附壁現(xiàn)象、沉淀等也會耗損細(xì)胞。George Chow 等[3]1984年指出腦脊液離體室溫(22°C) 兩小時后,40%白細(xì)胞發(fā)生溶解,在同一時間4°C 5%的白細(xì)胞溶解。室溫五個小時后,53%的白細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞溶解,而冷藏會下降到31%。這些數(shù)據(jù)的臨床意義是顯而易見的。如果不及時冷藏CSF的分析樣本,白細(xì)胞裂解將導(dǎo)致一個錯誤印象的白細(xì)胞數(shù)量。有的臨床實驗室腦脊液常規(guī)采用全自動血液分析儀體液模式進(jìn)行計數(shù),然而腦脊液形態(tài)學(xué)檢查可能永遠(yuǎn)無法被自動血細(xì)胞分析儀所取代,不能被推薦為腦脊液分類計數(shù)的可靠工具[4]。
另外,免疫功能低下患者和結(jié)核性腦膜炎患者可出現(xiàn)無細(xì)胞/低白細(xì)胞腦脊液腦膜炎[5-6]。腦脊液常規(guī)和細(xì)胞學(xué)都是眼見為實的檢查,出現(xiàn)假陽性結(jié)果的可能性不大,對二者結(jié)果綜合分析,排除假陰性結(jié)果的誤導(dǎo)。
腦脊液常規(guī)檢查多采用0.5μL細(xì)胞計數(shù)池,國外采用3.20 μl Fuchs Rosenthal chamber細(xì)胞計數(shù)池(depth0.2 mm)收集腦脊液,腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查以腦脊液細(xì)胞沉淀器收集0.50 ml 腦脊液進(jìn)行細(xì)胞學(xué)觀察,腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查取樣是腦脊液常規(guī)檢查的 1000 倍,可降低取樣誤差。基于腦脊液細(xì)胞沉淀室法的腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查對白細(xì)胞的陽性檢出率高于常規(guī)腦脊液細(xì)胞計數(shù)。腦脊液常規(guī)檢查白細(xì)胞在計數(shù)板內(nèi)呈普哇松分布(Poisson distribution),標(biāo)準(zhǔn)差與細(xì)胞計數(shù)量的平方根呈反比。因此,當(dāng)腦脊液白細(xì)胞數(shù)正;蛱幱谂R界值時,更應(yīng)注意參考細(xì)胞學(xué)結(jié)果[7]。假設(shè)某腦脊液白細(xì)胞計數(shù)為5/μL,則實際計數(shù)到細(xì)胞數(shù)只有2.5個,可計算出CV63.2%,95%可信區(qū)間為0~11/μL,說明在0~11個/μL范圍內(nèi),常規(guī)細(xì)胞計數(shù)無法提供更精確更可靠的數(shù)值。當(dāng)腦脊液白細(xì)胞計數(shù)低于50/μL,建議取體積較大的細(xì)胞學(xué)作為細(xì)胞分類的重要依據(jù)。 |