作者:田洪兵
單位:成都市錦江區(qū)婦幼保健院
檢驗科真空采血管可謂五顏六色,因檢測項目的需要添加相應(yīng)的抗凝劑,不同的抗凝管用不同的顏色加以區(qū)分,如圖1:

有抗凝的真空采血管,當(dāng)然也有任何成分都沒有的真空采血管,比如:常用的3mL或者5mL紅頭真空采血管。這類紅頭真空采血管常用來獲得血清,常用于全自動免疫化學(xué)發(fā)光的檢測項目的檢測,比如: 性激素、甲狀腺功能、中孕期母血清唐氏篩查、β-HCG等等的檢測。這類項目的檢測主要是擔(dān)心抗凝劑會對檢測結(jié)果造成干擾,所以我們采用無任何添加劑的真空采血管。那么本文的重點內(nèi)容就是這類紅頭的真空采血管采血后(分析前)的處理對檢驗結(jié)果的影響。

一位患者拿著檢驗結(jié)果到檢驗科質(zhì)疑檢驗結(jié)果不對!患者自訴其雌二醇(E2)昨日在外院檢查時結(jié)果為五百多(未提供檢驗報告),今日在我院檢查雌二醇(E2)結(jié)果卻只有425.0pg/mL。對此提出質(zhì)疑!我立刻與患者的醫(yī)生聯(lián)系,了解得知患者是一位IVF,需要監(jiān)測雌二醇(E2)水平的變化。就患者目前正常情況當(dāng)然是升高而不是降低!檢驗結(jié)果與臨床診斷不相符! 于是我找到當(dāng)日患者的血液樣本,立刻將患者樣本上機復(fù)測,得出的結(jié)果為:526pg/mL!顯然與第一次的結(jié)果相差很大! 與患者自述昨日在外院檢測結(jié)果相近,為什么同一樣本在相同的實驗條件下前后測出的結(jié)果會差距如此大?
囑咐患者靜坐20分鐘后,使用紅色無抗凝劑真空采血管采集患者坐位肘部靜脈血3mL。將樣本顛倒混勻,置于37℃恒溫箱中孵育。期間顛倒混勻10次,直到血液凝固,繼續(xù)置于37℃恒溫箱中孵育,有明顯的淡黃色血清析出時,將樣本放入離心機以4000r/min離心10分鐘。分離得到清晰透明的黃色血清,將樣本放入貝克曼DXI800全自動免疫化學(xué)發(fā)光儀測試。最后得出患者的雌二醇(E2)的檢驗結(jié)果為716 pg/mL!這個結(jié)果顯然與患者上午采集的第一個樣本檢測存在著明顯巨大的差異!
在分析和排查了各種各樣原因以后,我將兩個血液樣本放在一起進行了比對。最終找到了此次事件的根本原因,那就是難以用肉眼發(fā)現(xiàn)的血清微凝集!雖然兩管血液樣本都是清晰透明的黃色血清,但在患者上午的血液樣本中,在細胞上層的血清層發(fā)現(xiàn)了膠凍狀的凝固血清,這就是造成此次事件罪魁禍?zhǔn)!使用一次性的無菌棉簽棒將膠凍狀的血清攪動擠壓重新離心后,重新上機測試雌二醇(E2),得到的結(jié)果為709 pg/mL!案件終于真相大白!
中孕期母血清唐氏篩查的樣本在檢測完后需要分離血清,將分離的血清裝在1.5mL的一次性微量離心管中,置于零下70℃(-70℃)的超低溫冰箱內(nèi)保存2年以上。在分離唐氏篩查的患者血清時,一管外觀血清層清晰透明毫無異樣的標(biāo)本無法正常分離!血清層已經(jīng)凝固成膠凍狀!查看患者的檢查結(jié)果為:唐氏篩查高風(fēng)險!使用一次性的無菌棉簽棒將膠凍狀的血清攪動擠壓重新離心后,重新上機測試!得出的結(jié)果為:唐氏篩查低風(fēng)險,兩個截然相反的結(jié)果!當(dāng)然是因為血清層凝固使游離雌三醇(E3)的檢測結(jié)果有差異造成的!
1、在長期與紅色無抗凝劑的真空采血管打交道的過程中,如果想獲得一份合格的血清樣本,采血后需要將樣本顛倒混勻,不管是靜置于室溫還是孵育箱都需要再次混勻直到血液凝固,有清晰的黃色血清析出時再離心方可得到合格得血清,如下圖:

2、假如采血后不顛倒混勻,直接靜置于試管架上,血液中的細胞成分受到重力作用自然沉降。離體后的血清通過凝血機制發(fā)生凝固,如下圖:

+++++

血液細胞成分和血清分離,血清凝固 這樣的樣本是無法通過離心獲得合格的血清。
一份合格的檢驗報告需要檢驗科醫(yī)務(wù)人員做好分析前質(zhì)量保證、分析中質(zhì)量保證、分析后質(zhì)量保證。三個環(huán)節(jié)環(huán)環(huán)相扣,哪一個環(huán)節(jié)出了問題都會影響最終患者的檢驗結(jié)果。本文通過日常工作中遇到的兩個典型案例和日常工作總結(jié),提出一點有參考意義的分析前質(zhì)量保證的方法。當(dāng)然影響檢驗結(jié)果的因素是多種多樣,我們只有做好每一個步驟才能夠 "檢以求真"!