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本文轉(zhuǎn)載自楊朝美 檢驗醫(yī)學 作者 | 楊朝美 單位 | 重慶市急救醫(yī)療中心檢驗科 蛋白尿是腎小球損傷，腎小管間質(zhì)損傷及慢性腎臟疾病的獨立危險因素，并對預測腎小球微血栓形成有重要價值。尿蛋白排泄量檢測定性陽性或每日尿蛋白定量>150mg/24尿,為蛋白尿。24小時尿蛋白檢測是腎臟疾病診斷、監(jiān)測及預后判斷的傳統(tǒng)標志物，曾被譽為病理性蛋白尿診斷的“金標準”。但該檢測標本留取困難和繁瑣，以及標本留取不合格會對檢測結(jié)果產(chǎn)生較大影響而存在應用方面的不足。 患者，男性，52歲，尿液常規(guī)分析尿蛋白定性弱陽性，尿素，肌酐檢測正常。24小時尿蛋白檢測為-90.3g/24h（見圖1、圖2）,經(jīng)復查及送外院實驗室比對檢測，結(jié)果均為“負值”。
圖1
圖2 24小時尿蛋白檢測設備為貝克曼（AU5821）全自動生化分析儀，檢測原理：腦脊液中的蛋白質(zhì)與酚紅和鉬酸鹽反應可在酸性條件下形成紅色復合物，吸光度的增加與蛋白質(zhì)濃度成正比，不同類型的蛋白質(zhì)均可參與反應。 此病例標本采集為居家采集送檢，未冷藏保存，未加防腐劑。排除檢測誤差后的復查結(jié)果，以及送外院比對檢測（同一檢測設備，不同檢測試劑）結(jié)果均為負值。主要考慮檢驗前因素即樣本采集、保存方面的影響和干擾。 有研究表明24小時的尿標本在常溫條件（25℃）下放置后對其尿蛋白的檢測結(jié)果無影響，但氣溫變化，室內(nèi)外溫度變化又無恒濕設施等情況下，居家尿液標本的收集與實驗室條件下的常溫不具可比性。另外，尿液常溫條件下保存2h后,尿液PH值會因細胞分解會造成而升高，；且常溫保存的尿液容易滋生細菌，還有因為光照原因引起尿膽原分解的現(xiàn)象。以上原因?qū)Y(jié)果的影響尚未可知。 氨基水楊酸，阿司匹林，巴比妥鹽等對24小時尿蛋白檢測有影響，具體影響情況報道較少。 在醫(yī)護人員的指導下采集24小時尿標本,混勻后取適量尿液送檢并記錄尿量。標本采集和保存過程中存在影響因素：如保存溫度、防腐劑有無使用 、標本留取方法 、放置時間 、環(huán)境因素、藥物代謝產(chǎn)物等。 1、晨起后囑患者排尿后留尿，一般在早晨7時開始至次晨7時最后排尿，將期間24小時全部排出的尿液，盛于備好的容器內(nèi)。 2、混勻尿后取尿液10-20mL于干凈容器內(nèi)立即送檢，并注明24小時尿液總量。 1、女性月經(jīng)期，不建議做此檢查。尿中如混有血液、陰道分泌物，可造成“假性蛋白尿”。送檢容器需有蓋以防尿液揮發(fā)或溢灑。 2、送檢容器應注明床號姓名，及尿量。 3、避光及陰涼處保存送檢。 1、為防止標本變質(zhì)，病人第一次排尿后在容器內(nèi)加入防腐劑。 2、24小時尿蛋白定量、24小時尿白蛋白、及24小時尿糖檢測：用甲苯防腐（0.5-1毫升/100毫升尿）。 3、內(nèi)生肌酐清除率檢測：用甲苯、硼酸(每100毫升尿液加入1克）或苯甲酸防腐。 4、香草扁桃酸（VMA)、兒茶酚胺、17酮類固醇：使用濃鹽酸（10毫升）防腐。 有研究表明[1]，在2-8℃保存條件下，24小時尿蛋白可穩(wěn)定保持24小時，在室溫下2小時內(nèi)測定結(jié)果無明顯改變，24小時結(jié)果顯著升高；甲醛會降低24小時尿蛋白測定值，而二甲苯對24小時尿蛋白測定值沒有影響。 留取24h尿檢測，需將尿標本放于2—8℃冰箱保存或室溫下加入lml／L二甲苯防腐。 24小時尿蛋白檢測推薦的常用防腐劑為二甲苯，形成一層不溶于水的薄膜于尿液上層，用生化分析儀檢測會使結(jié)果降低，且易造成樣品加樣時的堵塞。同時甲苯屬于致癌物，并購買渠道受限。 對24h尿蛋白定量檢測定量是否需要添加防腐劑，并能確保檢測結(jié)果的準確，有相關臨床研究證實[2-3]，在4℃、25℃、37℃時，24h尿蛋白檢測是否加防腐劑，對結(jié)果并無顯著影響，但在25℃、37℃保存時，尿液標本結(jié)果波動較4℃較為明顯，因此，4℃條件下保存，不加防腐劑的檢測結(jié)果最優(yōu)。 患者用物對尿檢結(jié)果影響不同。造成假陰性結(jié)果的藥物包括：青霉素、先鋒霉素、頭孢菌素等；造成假陽性的藥物包括：季銨鹽、喹啉類藥物、過氧化氫、氯丙嗪等;清蛋白輸注會使尿蛋白排泄也會增加。因此，分析檢測結(jié)果時應考慮病人的用藥情況。 24h尿蛋白檢測標本需留取24小時尿標本，操作費時繁瑣，國內(nèi)外研究學者[4-6]利用人體尿肌酐排泄穩(wěn)定的特點，發(fā)現(xiàn)測定尿蛋白/尿肌酐與24小時尿蛋白定量具有較好的相關性，呈良好的正相關。尿蛋白/尿肌酐檢測標本采集簡單、快捷，結(jié)果不受標本采集困難及尿量不準造成的檢測誤差。 參考文獻： [1]王修全,蘭慧,吳孟軒.24小時尿蛋白定量檢測樣本保存方法的探討[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥,2010,29(23):97-98. [2]楊露祺,陳文娟,趙亞萍,袁細.24h尿蛋白定量檢測的影響因素研究進展[J].檢驗醫(yī)學與臨床,2020,17(19):2899-2901. [3]黃燕青.三種保存方法對24h尿蛋白定量檢測結(jié)果的影響[J].中國醫(yī)藥科學,2018,8(3):141-143. [4]Medina-Rosas J，Su J，Cook R J，et al. Comparison of SpotUrine Protein to Creatinine Ratio to 24-Hour Proteinuria to IdentifyImportant Change Over Time in Proteinuria in Lupus[J]. JCR：Journal of ClinicalRheumatology，2017,23（6）:301-307. [5]Pelizzola M，Gruarin M，Conti L，et al. Comparison Of DipstickProteinuria And Urinary Protein To Creatinine Ratio For EarlyDetection Of Albuminuria：A Retrospective Study In 868Canine Urine Samples[J]. Journal of Veterinary Internal Medicine，2014，28（2）：718. [6]Sanchez-Ramos L，Gillen G，Zamora J，et al. Theprotein-to-creatinine ratio for the prediction of significantproteinuria in patients at risk for preeclampsia：a metaanalysis[J]. Annals ofClinical & Laboratory Science，2013，43（2）：211-220 END |
