1.原理

凝聚胺（polymatching）法首先利用低離子介質降低溶液的離子強度，減少紅細胞周圍的陽離子云，促進血清（漿）中的抗體與紅細胞相應抗原結合，再加入帶亞電荷的高價陽離子多聚物-凝聚胺溶液，中和紅細胞表面的負電荷。

縮短細胞間距，形成可逆的非特異性聚集，并使IgG型抗體直接凝集紅細胞。加入中和液后，僅由凝聚胺引起的非特異性聚集，會因電荷中和而分散，而由抗體介導的特異性凝集則不會分散。

2.標本采集

2.1標本種類：抽取靜脈血3-4ml待凝固后分離血清，將細胞配成5％鹽水懸液將供血者血樣以同樣方法分離血清（漿）和紅細胞懸液。

2.2標本要求：抗凝和干燥管均可，如用抗凝血主張用EDTAK2（mg/dz）抗凝標本應無溶血，切標簽齊全。

3.標本儲存：急診標本30分鐘內(nèi)完成操作，標本應至4℃冰箱保存7天。

4.標本運輸：室溫運輸。

5.標本拒收標準：細菌污染。溶血標本，標簽不齊全不能作測定。

6.試劑

6.1試劑名稱：凝聚胺試劑（polymatching）

6.2試劑生產(chǎn)廠家：（臺資）珠海貝索生物技術有限公司。

6.3試劑組成：

試劑1.低離子介質（LowLonicMedium，LIM）。試劑打開使用后，可置室溫貯存，未開封者2-10度貯存，有效期為2年。

試劑2.凝聚胺溶液（PolybreneSolution）。貯存及有效期同上。

試劑3.重懸液（ResuspendingSolution）。貯存及有效期同上。

試劑4.8.5％生理鹽水。

7.儀器

7.1血型血清索離心機：XTL-4.7上海離心機械研究所

7.2離心機：上海手術器械廠

7.3電熱恒溫水箱：北京長源實驗設備廠

7.4顯微鏡：OLYMPUS（日本）

8.操作步驟及結果判斷：

8.1供受者紅細胞用生理鹽水配成3-5％的細胞懸液。加樣量均為：血清2滴，紅細胞懸液1滴。主管：受血者血清+供者紅細胞懸液；次管：受者紅細胞懸液+供者血清；（陰陽對照管另設）檢驗星空搜集整理。

8.2各管分別加低離子介質0.6ml混勻置室溫1分鐘。加凝聚胺溶液2滴，混勻，置室溫15秒。

8.31000g（3000rpm），離心18秒，棄上清液，管底保留約2滴液體。輕搖

試管，觀察是否形成凝塊。如未形成凝塊，則重做前面試驗。

8.4加入2滴重懸液，輕輕混合，肉眼或顯微鏡下觀察結果。

8.5凝塊在1分鐘內(nèi)分散，試驗結果為陰性，供受者血液配合；反之，如依照為不同強度的凝塊，試驗結果判為陽性，供受者血液不配合。實驗結果必須在3分鐘內(nèi)判讀。

9.操作性能：快速簡便，特異性強，靈敏度較高，重復性好。

10.超出范圍結果處理：

10.1細胞自凝：在冬天氣溫較低時，某些病人血清中含有冷凝集素而導致交叉配血假陽性；遇此現(xiàn)象可用37℃-40℃生理鹽水洗滌紅細胞并置37℃水溶中輕輕搖動，觀察結果。

10.2若病人血清（血漿）含有肝素，如洗腎患者能影響配血，須多加4-6滴polybrene溶液以中和肝素。

10.3紅細胞懸液為5％為宜，過濃或過淡可使抗原抗體比例不適當，反應不明顯易誤判。

10.4各種原因引起的紅細胞溶解，誤判為不凝集，部分溶血時，可溶性血型物質中和了相應的抗體。

11.方法局限性：

11.1試管，滴管吸頭和玻片必須清潔干燥，防止溶血。

11.2操作方法應按規(guī)定，先加血清，然后再加紅細胞懸液，以便容易核實是否漏加血清。

11.3離心時間不宜過長或過短，速度不宜過快或過慢，以防假陽性或假陰性結果。

11.4觀察時應注意紅細胞呈特異性凝集，繼發(fā)性凝固及線狀排列的區(qū)別。